သဘာဝနှင့် ဓာတုဗေဒနည်းဖြင့် ထုတ်လုပ်ထားသော curcumin ကို ခွဲခြားရန် အထိရောက်ဆုံးနည်းလမ်းကား အဘယ်နည်း။

သဘာဝနှင့် ဓာတုဗေဒနည်းဖြင့် ပြုလုပ်ထားသော curcumin ကို ခွဲခြားရန် အထိရောက်ဆုံးနည်းလမ်းမှာ ၎င်းတို့၏ isotopic signatures၊ ဓာတုဗေဒသန့်စင်မှုနှင့် ဖွဲ့စည်းပုံဆိုင်ရာ ဝိသေသလက္ခဏာများတွင် ကွာခြားချက်များကို အသုံးချသည့် ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာနည်းပညာများ ပေါင်းစပ်အသုံးပြုခြင်း ဖြစ်သည်။ အသုံးများသော နည်းလမ်းများထဲတွင် Carbon-14 (C14) Testing၊ Stable Isotope Ratio Analysis (δ¹³C)၊ Chromatography-Mass Spectrometry (HPLC-MS/GC-MS)၊ Nuclear Magnetic Resonance (NMR) Spectroscopy နှင့် Microbial Degradation Assays တို့ ပါဝင်သည်။

၎င်းတို့အားလုံးထဲတွင် အကုန်အကျအသက်သာဆုံးစစ်ဆေးမှုမှာ Carbon-14 (C14) စစ်ဆေးမှုဖြစ်ပြီး သက်ရှိများတွင်တွေ့ရှိရသော်လည်း အချိန်ကြာလာသည်နှင့်အမျှ ယိုယွင်းပျက်စီးသွားသော ဤရေဒီယိုသတ္တိကြွ isotope C-14 ရှိနေခြင်းကို ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းဖြင့် သဘာဝနှင့် ဓာတုဗေဒနည်းဖြင့်ပြုလုပ်ထားသော curcumin ကို ခွဲခြားသိရှိနိုင်စေပါသည်။ ၎င်း၏အလုပ်လုပ်ပုံမှာ အောက်ပါအတိုင်းဖြစ်သည်။

​၁။ ပထမဦးစွာ Carbon-14 (C14) ဆိုတာဘာလဲ။
သဘာဝ C14: ကော့စမစ်ရောင်ခြည်များမှ လေထုထဲတွင် ထုတ်လုပ်သော C14 ကို အပင်များက အလင်းစွမ်းအင်သုံး အစာချက်လုပ်ခြင်းအတွင်း စုပ်ယူသည်။ ၎င်းသည် ခန့်မှန်းနိုင်သောနှုန်းဖြင့် ယိုယွင်းပျက်စီးသွားသည် (သက်တမ်းဝက်- ~၅,၇၃၀ နှစ်)။
​ဓာတုဗေဒနည်းဖြင့် ပြုလုပ်ထားသော vs. သဘာဝနည်းဖြင့် ပြုလုပ်ထားသော
​သဘာဝ ကာကူမင် (နနွင်းအမြစ်မှ): C14 ပါဝင်ပြီး ၎င်းသည် အသက်ရှင်သော အပင်များမှ ရရှိသောကြောင့် ဖြစ်သည်။
​ဓာတုဗေဒဆိုင်ရာ ကာကူမင် (ဓာတ်ခွဲခန်းတွင် ထုတ်လုပ်သည်): ရုပ်ကြွင်းလောင်စာမှရရှိသော ကာဗွန် (ဥပမာ ရေနံ) တွင် C14 မတွေ့ရှိရပါ (နှစ်သန်းပေါင်းများစွာကြာပြီးနောက် ယိုယွင်းပျက်စီးသွားသည်)။ အဘယ်ကြောင့်ဆိုသော် ဓာတုဗေဒနည်းဖြင့် ထုတ်လုပ်ထားသော ကာကူမင်သည် C14 မပါဝင်သောကြောင့်ဖြစ်သည်။

​၂။ C14 စမ်းသပ်ခြင်း မည်သို့အလုပ်လုပ်သည်​
နမူနာခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်း- ဓာတ်ခွဲခန်းတစ်ခုသည် Accelerator Mass Spectrometry (AMS) ကဲ့သို့သော နည်းပညာများကို အသုံးပြု၍ curcumin နမူနာတွင် ကျန်ရှိသော C14 ကို တိုင်းတာသည်။
အဓိပ္ပာယ်ဖွင့်ဆိုချက်:
သဘာဝ curcumin: C14 အဆင့်များကို တွေ့ရှိနိုင်သည် (ခေတ်မီအပင်ပစ္စည်းများနှင့် ကိုက်ညီသည်)။
​ဓာတုဗေဒနည်းဖြင့် ထုတ်လုပ်ထားသော ကာကူမင်- C14 သုညနီးပါး (ရေနံကဲ့သို့သော ပြန်လည်ပြည့်ဖြိုးမြဲမဟုတ်သော အရင်းအမြစ်များမှ ရရှိပါက)။

​၃။ ကန့်သတ်ချက်များနှင့် သတိပေးချက်များ
​ရင်းမြစ်ပစ္စည်း၏ သက်တမ်း-
သဘာဝ curcumin အတွက် အသုံးပြုသော အပင်ပါဝင်ပစ္စည်းများသည် အလွန်ဟောင်းနွမ်းနေပါက (ဥပမာ၊ ရင့်မှည့်နေသော နနွင်း)၊ C14 အဆင့်သည် သိရှိရန် အလွန်နိမ့်လွန်းနေနိုင်သည်။
​ဇီဝအခြေခံရင်းမြစ်များမှ ဓာတုဗေဒနည်းဖြင့်ပြုလုပ်ထားသောပစ္စည်းများ-
ရှားရှားပါးပါးပဲ၊ ဓာတုဗေဒနည်းဖြင့် ထုတ်လုပ်ထားသော curcumin သည် C14 ကို ထိန်းသိမ်းထားမည့် အပင်မှရရှိသော ကာဗွန် (ဥပမာ၊ ဂလူးကို့စ်) ကို အသုံးပြုနိုင်သည်။ သို့သော် စက်မှုလုပ်ငန်းသုံး ဓာတုဗေဒနည်းဖြင့် ထုတ်လုပ်ထားသော curcumin အများစုသည် ရေနံဓာတုဗေဒကို အသုံးပြုကြသည်။
​ထောက်လှမ်းမှု အာရုံခံနိုင်စွမ်း:
AMS သည် အလွန်အာရုံခံနိုင်စွမ်းရှိပြီး နမူနာဟောင်းများတွင်ပင် C14 သဲလွန်စကို တိုင်းတာနိုင်သော်လည်း အလွန်အမင်း ယိုယွင်းပျက်စီးနေသော အပင်ပစ္စည်းများသည် အနုတ်လက္ခဏာဆောင်သော စစ်ဆေးမှုရလဒ် ဖြစ်နိုင်ပါတယ်။

​၄။ C14 ကို အသုံးပြု၍ စမ်းသပ်ရန် အဆင့်များ
နမူနာတစ်ခုစုဆောင်းပါ- သန့်စင်သောနမူနာကိုရယူပါ ကာကူမင် ထုတ်ယူမှု သို့မဟုတ် အမှုန့်။
​ဓာတ်ခွဲခန်း ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်း- နမူနာကို ရေဒီယိုကာဗွန် ရက်စွဲသတ်မှတ်ခြင်းတွင် အထူးပြုသည့် အသိအမှတ်ပြုဓာတ်ခွဲခန်း (ဥပမာ Beta Analytic၊ IsoForensics) သို့ ပေးပို့ပါ။
ရလဒ်များကို နှိုင်းယှဉ်ပါ-
ခေတ်သစ် C14 အဆင့်များ- သဘာဝဇာစ်မြစ်ကို အတည်ပြုသည်။
​နောက်ခံရောင်ခြည်အဆင့်များ- ဓာတုဗေဒနည်းဖြင့် ဖြစ်ပေါ်လာသော မူလအစကို ညွှန်ပြသည်။

​၅။ ကုန်ကျစရိတ်နှင့် လက်တွေ့ကျမှု
​ကုန်ကျစရိတ်: C14 စစ်ဆေးမှုသည် စျေးကြီးပြီး များသောအားဖြင့် သုတေသန သို့မဟုတ် အန္တရာယ်များသော အထောက်အထားစိစစ်ခြင်းအတွက် အသုံးပြုလေ့ရှိသည်။
အခြားရွေးချယ်စရာ- ပုံမှန်စမ်းသပ်မှုအတွက်၊ ​​HPLC​​ သို့မဟုတ် ​​isotopic ratio mass spectrometry (IRMS​) သည် curcuminoid ပရိုဖိုင်များနှင့် carbon isotopes (C13/C12) ကို ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာရန် ပိုမိုလက်တွေ့ကျနိုင်ပါသည်။

​အဓိကအချက်များ
သဘာဝ curcumin: လတ်ဆတ်သော အပင်မှ ရရှိပါက တိုင်းတာနိုင်သော C14 ပြသနိုင်ဖွယ်ရှိသည်။
​ဓာတုဗေဒနည်းဖြင့် ပြုလုပ်ထားသော curcumin: ရေနံဓာတုဗေဒပစ္စည်းများမှ ပြုလုပ်ပါက C14 ချို့တဲ့လေ့ရှိသည်။
အကောင်းဆုံးအသုံးပြုမှုအခြေအနေ- C14 စစ်ဆေးမှုသည် တန်ဖိုးမြင့်ထုတ်ကုန်များကို အတည်ပြုရန် သို့မဟုတ် ဈေးကြီးသော ဖြည့်စွက်စာများတွင် မသမာမှုများကို ထောက်လှမ်းရန်အတွက် အကောင်းဆုံးဖြစ်သည်။ စားသုံးသူအများစုအတွက်၊ ပြင်ပဓာတ်ခွဲခန်းအစီရင်ခံစာများ (COAs) သို့မဟုတ် ရင်းမြစ်ရှာဖွေခြင်းပွင့်လင်းမြင်သာမှုသည် ပိုမိုရရှိနိုင်သော ရွေးချယ်မှုတစ်ခုဖြစ်သည်။
ဓာတုဗေဒနည်းဖြင့် ထုတ်လုပ်ထားသော curcumin ကို သံသယရှိပါက isomer အချိုးအစားများကို အတည်ပြုရန်နှင့် စစ်မှန်ကြောင်းသေချာစေရန် C14 စစ်ဆေးမှုကို HPLC ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုနှင့် တွဲဖက်စစ်ဆေးပါ။

နောက်ဆုံးအနေနဲ့ C14 စမ်းသပ်မှုက မလုံလောက်ဘူးဆိုရင် ပိုမိုတိကျတဲ့ စမ်းသပ်မှုရဖို့ အောက်မှာ အကြံပြုထားတဲ့ ပေါင်းစပ် workflow တစ်ခု ရှိပါတယ်။
အဆင့် ၁: C14 စမ်းသပ်ခြင်း

C14 ကို တွေ့ရှိပါက → သဘာဝ။
C14 မရှိပါက → δ¹³C ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုသို့ ဆက်သွားပါ။
အဆင့် ၂: δ¹³C အိုင်ဆိုတုပ်အချိုး
အပင်အပိုင်းအခြားများနှင့် ပိုမိုနီးကပ်သောတန်ဖိုးများ (-၂၄‰ မှ -၁၂‰) သည် သဘာဝဇာစ်မြစ်ကို ညွှန်ပြသည်။
ရုပ်ကြွင်းလောင်စာကဲ့သို့သော တန်ဖိုးများသည် ဓာတုဗေဒနည်းဖြင့် ထုတ်လုပ်ထားသော မူလအစကို အတည်ပြုပါသည်။

အဆင့် ၃: မသန့်စင်မှုများအတွက် HPLC-MS

ကျန်ရှိနေသော ပျော်ရည်များ၊ သဘာဝမဟုတ်သော ဘေးထွက်ပစ္စည်းများ သို့မဟုတ် isomer အချိုးများကို ထောက်လှမ်းပါ။
အဆင့် ၄: ဖွဲ့စည်းပုံဆိုင်ရာ အတည်ပြုချက်အတွက် NMR
curcuminoid ဖွဲ့စည်းပုံနှင့် အသေးစား အစိတ်အပိုင်းများကို အတည်ပြုပါ။